甘蔗R2R3-MYB类似基因Sc2RMyb1的克隆及表达特性分析

• 作者: 徐景升 李国印 王恒波 苏亚春 许莉萍 郭晋隆 阙友雄
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 甘蔗 R2R3-MYB 转录因子 克隆 基因表达 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1009-1017
• 分类号: S566.1
• 字数: 5893字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2012.09.004

摘要

R2R3-MYB是MYB转录因子基因家族的主要成员,已被证明在次生代谢和非生物逆境胁迫应答中起重要作用.为获得甘蔗(Saccharum complex) R2R3-MYB转录因子基因序列信息及其在不同非生物因子胁迫下的表达情况,本研究通过对甘蔗EST数据的分析,运用电子克隆获得一个甘蔗R2R3-MYB类似基因序列,进而采用PCR方法从甘蔗中克隆了该基因的基因组DNA和cDNA序列,基因命名为Sc2RMyb1(GenBank序列号:JQ823165).Sc 2RMyb1的基因组DNA全长1 807 bp,由3个外显子和2个内含子构成,编码区长度为1 284 bp,编码427个氨基酸.构建含有Sc2RMyb1基因的原核表达载体并转入大肠杆菌(Escherichia coli),经IPTG诱导产生的重组蛋白相对分子量约为52 kD.在NaC1胁迫的LB培养基上,重组菌生长明显优于对照菌.实时荧光定量PCR分析表明,甘蔗中Sc2RMyb1基因的表达受H2O2和NaC1抑制而下调,推测该基因作为负调节因子参与了NaC1胁迫应答相关基因的调控过程.本研究结果为后续该类转录因子基因在甘蔗抗逆相关机理研究和抗逆育种中的应用提供了基础资料.