低体积PCR扩增用于单细胞分离和检验

• 作者: 严红 朱典 李彩霞 李艮平 胡兰 韩俊萍
• 来源期刊: 法医学杂志
• 学科: 政治法律
• 关键词: 法医遗传学 核酸扩增技术 单细胞
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 技术与应用
• 页码范围: 123-125
• 分类号: DF795.2
• 字数: 2427字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5619.2012.02.012

摘要

目的 优化在单细胞分离检验中应用0.2 mL试管做低体积扩增载体的最佳反应条件.方法 制备理想口腔上皮细胞悬液,用0.2 mL试管分别收集捕获到的5、10个细胞,设置蛋白酶K添加、PCR反应金牌酶用量、循环次数3组条件,用Identifiler(R) Plus试剂盒进行复合扩增,比较各组的检出率、等位基因丢失率和非特异性扩增情况.结果 用0.2mL试管做低体积扩增中,加蛋白酶K裂解、PCR反应金牌酶0.4 μL、PCR反应32个循环,这3个条件的检出率较高,等位基因丢失率较低. 结论 在单细胞分离检验中采用0.2 mL试管进行低体积扩增,可以作为芯片-低体积扩增的有效补充手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡兰		66	373	11.0	16.0
3	李彩霞		41	152	7.0	10.0
5	严红		11	38	4.0	5.0
8	朱典		3	9	1.0	3.0
9	韩俊萍		5	21	2.0	4.0
10	李艮平		5	19	2.0	4.0