启动子甲基化致OPCML基因失活在胃癌发病中的作用

• 作者: 元刚 张宁 许继德 邢象斌 陈旻湖 陈洁
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 年，卷（期）: 2012,（16）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2367-2371
• 分类号: R735.2
• 字数: 3575字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2012.16.001

摘要

目的 探讨OPCML基因在胃癌细胞株中的失表达及其与基因启动子CpG岛甲基化的关系,并分析OPCML对胃癌细胞增殖的影响.方法 (1)实验组为胃癌细胞株(SGC7901、AGS、MKN28、MKN45、N87、KATOⅢ和SNU1),对照组为正常胃组织,分别采用RT-PCR检测两组细胞OPCML mRNA的表达.(2)用亚硫酸盐修饰正常胃组织的DNA和胃癌细胞MKN45的DNA,分别采用甲基化特异性PCR法检测OPCML基因启动子区甲基化情况.(3)实验组为药物处理组,即5-氮胞苷(5-AZA)去甲基化处理胃癌细胞MKN45,对照组为未经药物处理的MKN45,分别采用RT-PCR检测OPCML mRNA的表达变化.(4)RT-PCR检测转染OPCML表达载体及pcDNA3.1空载体后mRNA的表达情况.(5)实验组为OPCML表达载体转染胃癌细胞AGS,对照组为空载体转染胃癌细胞AGS,使用浓度为0.5 mg/mL的新霉素(G418)对转染细胞进行筛选,观察OPCML对胃癌细胞AGS集落形成的影响.结果 (1)在胃癌细胞株中OPCML mRNA 的表达率显著低于正常胃组织.(2)胃癌细胞AGS和MKN45的甲基化程度明显高于正常胃组织.(3)5-AZA处理MKN45细胞后,OPCML表达上调.(4)OPCML表达载体转染HEK293A、AGS、MKN45细胞后,RT-PCR检测显示OPCML高表达.(5)外源性表达OPCML可抑制胃癌细胞AGS的集落形成率.结论 OPCML基因作为肿瘤抑制基因,在胃癌细胞中的表达下调.OPCML表达下调与该基因启动子区甲基化密切相关.药物性去甲基化处理能够恢复OPCML的表达.在表达沉默的AGS细胞中外源性表达OPCML,抑制集落形成率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许继德	广州医学院生理学教研室	42	348	13.0	16.0
2	陈洁	中山大学附属第一医院消化科	104	482	12.0	18.0
3	陈旻湖	中山大学附属第一医院消化科	191	1602	20.0	28.0
4	元刚	中山大学附属第一医院消化科	29	148	7.0	11.0
5	邢象斌	中山大学附属第一医院消化科	5	16	2.0	4.0
6	张宁	广州医学院生理学教研室	1	6	1.0	1.0