荧光标记胆固醇用于测定人单核巨噬细胞脂质外流

• 作者: 严晓伟 宋玮 王伟 王雨 窦丽阳 陈连凤
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胆固醇外流 巨噬细胞 荧光标记的胆固醇 高密度脂蛋白 载脂蛋白A1
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 方法学研究
• 页码范围: 749-754
• 分类号: R5
• 语种: 中文

摘要

目的 利用荧光标记的胆固醇(NBD-胆固醇)建立测定人巨噬细胞胆固醇外流的新方法,并与传统同位素标记胆固醇的测定方法进行比较.方法 提取受试者外周血单核细胞分化为人巨噬细胞.体外培养人单核细胞系THP-1及鼠单核细胞系J774.以不同浓度的NBD-胆固醇孵育THP-1细胞,观察胆固醇浓度和孵育时间对细胞摄取的影响.用荧光酶标仪测定荧光信号强度以反映胆固醇摄取和外流.分别在三种细胞中测量NBD-胆固醇外流率,并在原代人巨噬细胞中观察与同位素标记胆固醇外流率的相关性.结果 NBD-胆固醇孵育细胞后迅速分布于细胞器中,但不进入细胞核.细胞对NBD-胆固醇的摄取有浓度依赖性,但达峰时间不受浓度影响.NBD-胆固醇外流率在各种巨噬细胞中呈现相似趋势,由载脂蛋白A1和高密度脂蛋白诱导的外流率在诱导外流4h达到平台期.3H-胆固醇外流率在人巨噬细胞中与NBD-胆固醇外流率显著相关(r=0.968,P＜0.001).结论 NBD-胆固醇是一种有效的、敏感且环保的探针,可替代同位素标记的胆固醇用于巨噬细胞外流率的测定.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严晓伟	北京协和医院心内科	30	228	9.0	14.0
2	宋玮	北京协和医院心内科	2	11	1.0	2.0
3	王伟	北京协和医院心内科	3	34	3.0	3.0
4	王雨	北京协和医院心内科	2	24	2.0	2.0
5	窦丽阳	北京协和医院心内科	1	11	1.0	1.0
6	陈连凤	北京协和医院心内科	6	19	2.0	4.0