鼠抗早孕因子单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 吴晓亮 温志锋 王家骥 练玉银 聂湘辉
• 来源期刊: 中国热带医学
• 学科: 医学
• 关键词: 早孕因子 单克隆抗体 鉴定
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 532-534
• 分类号: R714.15
• 语种: 中文

摘要

目的 制备鼠抗早孕因子(EPF)单克隆抗体,纯化并进行鉴定.方法 用重组EPF免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术获得抗EPF杂交瘤细胞株,注入BALB/c小鼠腹腔制备腹水型单抗,Protein-G亲和层析纯化后,SDS-PAGE电泳鉴定其纯度,用间接ELISA法测抗体效价,ELISA相加试验测定抗原表位,用Western blotting鉴定其特异性,并进行类及亚类、细胞染色体核型分析.结果 筛选出2株具有较高活性和良好稳定性的分泌抗EPF单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其腹水的抗体效价均高于2×10-5,2株单抗均为IgG类IgG1亚类,轻链类型均为κ细胞核型分析符合杂交瘤细胞特征,特异性良好,2株单抗有不同的抗原表位.SDS-PAGE电泳显示纯化后抗体有较高的纯度,Western blotting表明其与EPF抗原有特异结合性.结论 成功制备2株具有较高活性的鼠抗EPF单克隆抗体,为建立检测EPF方法奠定了良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王家骥	广州医学院公共卫生学院	146	1258	18.0	25.0
2	练玉银	广州医学院公共卫生学院	16	80	5.0	8.0
3	温志锋	广州医学院公共卫生学院	2	5	1.0	2.0
4	吴晓亮	广州医学院公共卫生学院	4	21	3.0	4.0
5	聂湘辉	广州医学院公共卫生学院	1	4	1.0	1.0