烟草抗病毒相关R基因RNAi表达载体的构建

• 作者: 刘慧 孙玉合 李元元 李凤霞 杨帆 杨爱国 王元英 王鲁 苏振刚 赵百英
• 来源期刊: 中国烟草科学
• 关键词: 烟草 病毒病 R基因 RNAi GATEWAY技术
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 23-26
• 分类号: TS413
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5119.2012.01.005

摘要

RNA干扰介导的基因沉默是植物抗病育种和大规模分析功能基因快速而有效的方法.构建烟草抗病毒病相关R基因的RNAi表达载体并导入烟草可获得抗病毒病烟草材料,并为大规模分析鉴定烟草功能基因提供新方法.本研究利用绒毛状烟草基因组测序获得的R基因序列设计引物,通过PCR技术扩增出带有特异性结合位点attB的R基因部分序列.采用GATEWAY方法将目的基因的干扰片段插入到表达载体pH 7 GWIWG2(Ⅰ),成功构建了烟草抗病毒病相关R基因的RNAi表达载体.