银杏ISSR-PCR扩增反应体系的建立与优化

• 作者: 姚涛 张耀川 徐奭 李树成 牛振刚 白素兰 陈文俐
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 银杏 ISSR-PCR 反应体系优化
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 80-85
• 分类号: Q78
• 字数: 4918字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2012.01.020

摘要

目的:为了对银杏进行分子鉴定和遗传关系的分析,建立银杏ISSR-PCR的最佳扩增反应体系.方法:采用正交设计和单因素梯度实验,对影响ISSR-PCR反应体系的5个主要因素(Mg2+、dNTP、引物、模板DNA及Taq DNA聚合酶)进行筛选及优化.结果:银杏25 μL ISSR最佳扩增反应体系包含10×Taq反应缓冲液、2.5 mmol/L MgCl2、0.45 mmol/L dNTP、1.2 μmol/L引物(UBC861)、10 ng模板DNA及0.9 UTaq DNA聚合酶,使用此ISSR扩增反应体系,获得了10株不同性别银杏DNA的清晰条带,验证了该体系的稳定性.结论:优化的反应体系为采用ISSR分子标记技术对银杏进行遗传多样性分析、遗传育种和转基因等研究奠定了一定的理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	白素兰	首都师范大学生命科学学院	9	57	5.0	7.0
2	张耀川	北京农业职业学院园艺系	11	46	4.0	6.0
3	徐奭	首都师范大学生命科学学院	5	66	4.0	5.0
4	陈文俐	中国科学院植物研究所	10	127	4.0	10.0
5	李树成	首都师范大学生命科学学院	1	14	1.0	1.0
6	姚涛	首都师范大学生命科学学院	2	24	2.0	2.0
7	牛振刚	首都师范大学生命科学学院	1	14	1.0	1.0