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一种磷酸化蛋白质组定性定量分析方法的考察
一种磷酸化蛋白质组定性定量分析方法的考察
作者:
刘金凤
李明春
程艳芹
纪松岗
蔡芸
赵丽艳
钱小红
马守栋
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
比较蛋白质组学
双向差示凝胶电泳
Pro-Q Diamond荧光染色
磷酸化蛋白质
摘要:
目的 对用于磷酸化蛋白质的相对定量分析的一种基于双向差示凝胶电泳(2-D DIGE)技术和Pro-Q Diamond 荧光染色的方法进行考察.方法 采用DIGE技术,从Pro-Q Diamond染色后对Cy2、Cy5荧光强度的影响、Pro-QDiamond染色过程中采用的试剂对CyDye标记的蛋白质的影响、去离子水对DIGE扫描结果的影响、CyDye染料扫描的稳定性影响等方面,考察了该方法的有效性和特异性.结果 在Pro-Q Diamond染色前对DIGE凝胶进行处理的过程中,有多种因素影响荧光强度变化,以致在进行pro-Q Diamond染色后,凝胶点的荧光强度变化无法区分是染色造成的灰度值变化还是CyDye染料自身的变化,从而使通过荧光强度变化来定量检测磷酸化蛋白质变得困难.结论 不宜采用对同一DIGE凝胶进行Pro-Q Diamond再染色检测磷酸化蛋白质的方法进行比较蛋白质组学的定量分析,为能同时展示出胶上的磷酸化蛋白质和总蛋白质,可通过DIGE实验与Pro-Q Diamond分开运行,再通过DIGE扫描图谱与Pro-Q Diamond染色图谱进行匹配的方法进行改进.
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文献信息
篇名
一种磷酸化蛋白质组定性定量分析方法的考察
来源期刊
热带医学杂志
学科
生物学
关键词
比较蛋白质组学
双向差示凝胶电泳
Pro-Q Diamond荧光染色
磷酸化蛋白质
年,卷(期)
2012,(12)
所属期刊栏目
实验研究论著
研究方向
页码范围
1434-1437,封4
页数
分类号
Q51
字数
语种
中文
DOI
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节点文献
比较蛋白质组学
双向差示凝胶电泳
Pro-Q Diamond荧光染色
磷酸化蛋白质
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研究来源
研究分支
研究去脉
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热带医学杂志
主办单位:
广东省寄生虫学会
中华预防医学会
出版周期:
月刊
ISSN:
1672-3619
CN:
44-1503/R
开本:
大16开
出版地:
广州市中山二路74号中山医学院
邮发代号:
创刊时间:
1979
语种:
chi
出版文献量(篇)
7964
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21
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32495
相关基金
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英文译名:
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官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
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学科类型:
数理科学
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