一种磷酸化蛋白质组定性定量分析方法的考察

• 作者: 刘金凤 李明春 程艳芹 纪松岗 蔡芸 赵丽艳 钱小红 马守栋
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 比较蛋白质组学 双向差示凝胶电泳 Pro-Q Diamond荧光染色 磷酸化蛋白质
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究论著
• 页码范围: 1434-1437,封4
• 分类号: Q51
• 语种: 中文

摘要

目的 对用于磷酸化蛋白质的相对定量分析的一种基于双向差示凝胶电泳(2-D DIGE)技术和Pro-Q Diamond 荧光染色的方法进行考察.方法 采用DIGE技术,从Pro-Q Diamond染色后对Cy2、Cy5荧光强度的影响、Pro-QDiamond染色过程中采用的试剂对CyDye标记的蛋白质的影响、去离子水对DIGE扫描结果的影响、CyDye染料扫描的稳定性影响等方面,考察了该方法的有效性和特异性.结果 在Pro-Q Diamond染色前对DIGE凝胶进行处理的过程中,有多种因素影响荧光强度变化,以致在进行pro-Q Diamond染色后,凝胶点的荧光强度变化无法区分是染色造成的灰度值变化还是CyDye染料自身的变化,从而使通过荧光强度变化来定量检测磷酸化蛋白质变得困难.结论 不宜采用对同一DIGE凝胶进行Pro-Q Diamond再染色检测磷酸化蛋白质的方法进行比较蛋白质组学的定量分析,为能同时展示出胶上的磷酸化蛋白质和总蛋白质,可通过DIGE实验与Pro-Q Diamond分开运行,再通过DIGE扫描图谱与Pro-Q Diamond染色图谱进行匹配的方法进行改进.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱小红		17	157	8.0	12.0
2	程艳芹		26	149	6.0	11.0
3	李明春		68	228	7.0	13.0
4	纪松岗		12	42	3.0	6.0
5	马守栋		13	12	2.0	3.0
6	刘金凤		11	10	2.0	2.0
8	赵丽艳		15	25	3.0	4.0
11	蔡芸		1	0	0.0	0.0