藏酋猴微卫星富集文库的构建及微卫星分子标记的筛选

• 作者: 尹湧华 岳碧松 张修月 王中凯 王红星 贾小东
• 来源期刊: 四川动物
• 学科: 生物学
• 关键词: 藏酋猴 富集文库 微卫星
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 39-44
• 分类号: Q959.8|Q78
• 字数: 4669字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7083.2012.01.008

摘要

通过磁珠富集法构建了藏酋猴AC重复和AAAG重复的微卫星富集文库,分离微卫星序列并对其进行分析.将藏酋猴基因组DNA经Sau3AI酶切后纯化回收,连接特定接头.用生物素标记的探针与酶切片段杂交,捕获300～1000 bp片段,随后将获得的片段连接到pMD-19T载体上,转化至JM109中,成功构建藏酋猴微卫星富集文库.(AC)n富集文库和(AAAG)n富集文库的阳性克隆率分别为50%和10%左右.根据测序得到的48个微卫星序列成功设计了24对引物,最终筛选出6个微卫星标记,这些标记将为藏酋猴的遗传多样性研究、圈养种群结构的分析和遗传图谱的构建等奠定一定的基础.