BA-ELISA定量检测人血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa、CD62p的表达及其临床应用

• 作者: 史进方 张有涛 朱明清 程寅峰 蒋敏 赵益明 阮长耿 顾国浩
• 来源期刊: 苏州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 血小板 膜糖蛋白 生物素-亲和素系统 酶联免疫吸附试验 急性心肌梗死 急性脑梗死 糖尿病
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 524-527
• 分类号: R446.11+3
• 语种: 中文

摘要

目的 建立测定血小板膜糖蛋白功能的生物素-亲和素-酶联免疫吸附(BA-ELISA)方法,并探讨其临床应用价值.方法 采用抗血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa( GPⅡb/Ⅲa)单抗7E3和抗血小板CD62p单抗SZ51及生物素-亲和素系统建立BA-ELISA方法,并应用该方法检测50名健康志愿者、30例急性心肌梗死(AMI)、30例急性脑梗死(ACI)和30例糖尿病(DM)患者的血小板膜糖蛋白功能,并与流式细胞术(FCM)测定结果进行比较.同时,应用该方法对抑制性单抗SZ21和阿司匹林抑制血小板活化的功能效果进行测定.结果 该方法检测血小板计数敏感度低达3.13×109/L(7E3包被板)和6.25×109/L(SZ51包被板),批内和批间变异系数分别为6.23％～8.35％和4.38％～5.78％.测得AMI、ACI和DM患者ADP诱导的(未诱导的)血小板的GPⅡb/Ⅲa和CD62p表达量均显著高于健康志愿者(均P＜0.01).BA-ELISA测定表明,SZ21和阿司匹林可抑制ADP诱导的血小板功能(但P＞0.05).该方法和FCM同时测定健康志愿者、AMI、ACI和DM患者的GPⅡb/Ⅲa和CD62p表达水平.测定数据经直线回归分析得r =0.86.结论 BA-ELISA检测血小板的膜糖蛋白,可精确判断血小板的功能状态,为指导临床预防、诊治、评估疾病提供简便、可行的方法.活化的血小板膜糖蛋白测定可从凝血的角度对上述疾病的早期诊断、病情进展的判断、抗血栓药物的评估及疾病预后的判断起到辅助作用.