成人鼻黏膜间充质干细胞的体外培养和多向诱导分化

• 作者: 周月鹏 姜平 孙湘兰 张志坚 贺清华 陆汉强 黄秋生
• 来源期刊: 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 鼻黏膜 外胚层间充质干细胞 诱导分化 成骨细胞 神经细胞
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 490-493,498
• 页数: 5页
• 分类号: R322.31
• 语种: 中文

摘要

目的:观察成人鼻腔呼吸黏膜内间充质干细胞(MSCs)的分布特征,建立鼻黏膜MSCs的体外培养方法,探讨该细胞向神经细胞及成骨细胞分化的潜能.方法:将成人鼻腔呼吸黏膜制成冷冻切片,用Nestin和Vimentin抗体进行免疫荧光染色,观察MSCs在鼻黏膜内的分布特征.对鼻黏膜细胞进行体外培养、传代,扩增出MSCs,用于细胞标志蛋白Nestin,CD133,Vimentin和Sall4的抗体进行免疫荧光染色,鉴定该细胞的干细胞特性；分别用成骨诱导培养液(含地塞米松、维生素C和β-甘油磷酸钠)及神经诱导培养液(Neurobasal培养液含B27,ATRA,TSA)诱导MSCs向成骨细胞和神经细胞定向分化；用组织化学染色和免疫荧光染色方法评价其诱导分化效果.结果:Nestin和Vimentin免疫荧光染色阳性的MSCs主要存在于鼻黏膜的固有层内,通过体外培养、传代,可扩增出大量的MSCs,该细胞表达干细胞标志蛋白Nestin,CD133,Vimentin和Sall4；用成骨诱导剂诱导培养后,该细胞的碱性磷酸酶活性明显增强,茜素红染色显示细胞表面形成大量的钙结节；经神经诱导培养液诱导培养后,细胞生长出细长突起并互相连接成网,细胞高表达神经细胞标志蛋白NF-200和BM88.结论:成人鼻腔呼吸黏膜固有层内广泛存在MSCs,该细胞具有多向分化潜能,可作为种子细胞用于自体移植修复骨和神经组织损伤.