秦川牛生长抑制素基因克隆及原核表达研究

• 作者: 周光现 常馨月 张恩平 阚靖博
• 来源期刊: 家畜生态学报
• 学科: 农学
• 关键词: 秦川牛 肌肉生长抑制素 克隆 原核表达 蛋白印迹
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 科学研究
• 页码范围: 13-18
• 分类号: S811.6
• 字数: 4350字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-1182.2012.03.003

摘要

试验旨在通过基因工程方法获得重组肌肉生长抑制素蛋白.提取秦川牛的骨骼肌总RNA,根据基因库中海福特牛肌肉生长抑制素基因序列设计合成特异性引物,引物两端分别加上BamH I和Xho I酶切位点及保护碱基,用RT-PCR方法扩增肌肉生长抑制素全长基因,并将其克隆到pMD18-T载体上,测序后经BamH I和Xho I双酶切,将目的片段插入到PGEX-4T-1中,构建原核表达载体PGEX-4T-1-M,将重组表达质粒转化至Rosetta(DE3)中诱导表达.结果表明,扩增的秦川牛肌肉生长抑制素全长基因1 128 bp,克隆载体经过DNA序列测定,所得基因与GenBank上发表的一致；成功构建原核表达载体PGEX-4T-1-M,经IPTG诱导,表达出了GST-M融合蛋白,用GST标签抗体做Western blotting印记证明产物大约69 ku,与预期大小相符,并在Rosetta(DE3)菌中成功的进行融合蛋白表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张恩平	西北农林科技大学动物科学学院	62	375	10.0	17.0
2	常馨月	西北农林科技大学动物科学学院	4	15	3.0	3.0
3	周光现	西北农林科技大学动物科学学院	6	20	3.0	4.0
4	阚靖博	西北农林科技大学动物科学学院	2	7	1.0	2.0