西尼罗病毒前膜蛋白在果蝇细胞S2中的表达与鉴定

• 作者: 李林海 杜鹏 王文敬 石玉玲 陈丽丹 黎诚耀
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 西尼罗病毒 前膜蛋白 S2细胞
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究论著
• 页码范围: 1421-1423,1469
• 分类号: R373.9
• 语种: 中文

摘要

目的 克隆西尼罗病毒(WNV)前膜蛋白(prM)基因,将其在果蝇细胞(S2)中表达,为制备研制诊断试剂所需的单克隆抗体奠定基础.方法 以质粒WNV-CME为模板,PCR扩增获得prM基因,与T载体连接,测序正确后酶切,酶切产物与果蝇表达载体pMT/Bip/V5-HisC重组,重组质粒与pCoBlas共转染果蝇S2细胞,25 μg/ml Blasticidin筛选获得抗性细胞,500μmol/L CuSO4溶液诱导表达,72 h后收集细胞与细胞上清进行Western blot鉴定.结果 酶切与测序结果表明成功构建重组表达载体WNV-prM-pMT,Western blot显示目的蛋白在果蝇细胞S2内稳定表达.结论 在果蝇S2细胞内成功地稳定表达WNV prM蛋白,为下一步WNV单克隆抗体的制备奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	石玉玲	广州军区广州总医院检验科	134	972	13.0	24.0
2	王文敬	南方医科大学生物技术学院输血医学系	47	192	7.0	11.0
3	黎诚耀	南方医科大学生物技术学院输血医学系	36	184	8.0	11.0
4	李林海	广州军区广州总医院检验科	76	472	11.0	18.0
5	陈丽丹	广州军区广州总医院检验科	28	110	6.0	8.0
6	杜鹏	南方医科大学生物技术学院输血医学系	5	26	3.0	5.0