大螟中肠氨肽酶 N 基因的克隆及表达谱分析

• 作者: 侯茂林 王兴云 韩兰芝 马文静
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 大螟 Bt受体蛋白 氨肽酶N 基因克隆 表达谱
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 1022-1030
• 分类号: Q966
• 语种: 中文

摘要

昆虫中肠氨肽酶N是Bt毒素的重要受体之一,与Bt毒素的杀虫机制及昆虫Bt抗性的产生密切相关.本研究通过简并引物PCR结合RACE技术克隆并获得大螟Sesamia inferens Bt受体蛋白——氨肽酶N(aminopeptidase N,APN)基因的cDNA序列全长,经NCBI同源比对分析,认为该基因为APN3基因,并将其命名为SiAPN3(GenBank登录号为HQ636624).序列分析表明,该基因的cDNA序列全长为3 411 bp,开放阅读框为3 018 bp,编码1 006个氨基酸；预测蛋白质分子量为114 kD,等电点为4.95;其推导的氨基酸序列中具有鳞翅目昆虫氨肽酶N典型的结构特征,即含有1个N-和12个O-连接的糖基化位点,N-末端具有18个氨基酸的剪切信号肽,谷氨酸锌化氨肽酶保守结构GAMEN,锌结合位点HEXXHX18E,C-末端具有22个氨基酸的糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚信号肽.采用实时定量PCR研究了SiAPN3在大螟4龄幼虫肠道不同部位和幼虫不同龄期的转录表达谱.结果表明,该基因在幼虫中肠中的表达量最高,其次为后肠,前肠中表达量最低,且中肠和后肠中的表达量显著高于前肠(P＜0.05)；SiAPN3在3龄幼虫中的表达量最高,1龄幼虫中最低,虽然3、4日龄之间的表达量没有显著差异,但二者均显著高于其他日龄,1,2和5日龄之间不存在显著差异(P＞0.05).该研究为阐明APN基因的功能及大螟对Bt抗性产生的分子机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩兰芝	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	12	175	7.0	12.0
2	侯茂林	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	24	452	11.0	21.0
3	马文静	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	4	21	3.0	4.0
4	王兴云	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	1	6	1.0	1.0