应用RNA干扰沉默猪内源性反转录病毒

• 作者: 孙宇 章金刚 罗佳 马玉媛
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: RNA干扰 基因沉默 猪内源性反转录病毒
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 52-55
• 分类号: Q78
• 字数: 2666字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2012.01.014

摘要

目的:尝试应用RNA干扰(RNAi)沉默猪源PK-15细胞中的猪内源性反转录病毒(PERV),并通过反转录酶活性及pol基因相对荧光定量PCR检测沉默效果.方法:依据GenBank公布的PERV pol基因序列,采用Invitrogen公司的BLOCK-iT RNAi Designer软件设计Stealth小干扰RNA (siRNA)序列；将合成的siRNA转染PK-15细胞,72 h后检测细胞上清PERV反转录酶活性及细胞内pol基因拷贝数并评价沉默效果.结果:反转录酶活性及pol基因拷贝数检测结果表明,设计的3条Stealth siRNA序列中,位于pol基因3272～3296 bp的序列能有效沉默PERV.结论:RNAi方法可有效使猪源PK-15细胞中的PERV沉默,为进一步研究天然抗病毒分子与PERV的相互作用提供了实验基础,同时也为猪源异种移植研究中去除PERV提供了一种可供尝试的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	章金刚	军事医学科学院野战输血研究所	124	845	15.0	21.0
2	孙宇	军事医学科学院野战输血研究所	31	236	9.0	14.0
6	马玉媛	军事医学科学院野战输血研究所	27	129	7.0	9.0
7	罗佳	广西大学兽医学院	5	9	2.0	3.0