黄瓜Rubisco活化酶基因CsRCA表达载体构建与遗传转化

• 作者: 刘培培 姜振升 毕焕改 王美玲 艾希珍
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 黄瓜 核酮糖-1,5-二磷酸羧化/加氧酶(Rubisco) Rubisco活化酶(RCA) 遗传转化 过量表达
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 蔬菜
• 页码范围: 869-878
• 分类号: S642.2
• 语种: 中文

摘要

核酮糖–1,5–二磷酸羧化/加氧酶（Rubisco）是光合碳循环中的关键酶,为了探明其在植物体内的活化机制,用农杆菌介导法将Rubisco活化酶（RCA）基因CsRCA导入黄瓜,分别用PCR、real-timePCR和Western杂交法进行分子检测,分析转基因植株的表达量。酶切鉴定结果显示,CsRCA正向插入植物表达载体pCAMBIA1301的CaMV35S启动子和NOS终止子之间,成功构建CsRCA的正义表达载体。将pCAMBIA1301-CsRCA导入黄瓜自交系‘08-1’,获得7株转基因植株,拷贝数均为2（非转基因植株的拷贝数为1）,转化率约为3.5%。表达分析结果表明,7株T0代转基因植株叶片的CsRCA mRNA表达量为野生型（WT）的1~1.98倍,在蛋白水平的表达信号显著强于WT。T1代转基因植株的叶片叶绿素和类胡萝卜素含量、光合速率（Pn）及可溶性糖和淀粉含量均显著高于WT。研究结果表明,利用农杆菌介导法获得了稳定遗传的黄瓜CsRCA转基因植株,CsRCA过量表达能显著提高黄瓜叶片的Pn,增加干物质积累。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	艾希珍	山东农业大学园艺科学与工程学院作物生物学国家重点实验室	61	1625	21.0	39.0
2	王美玲	山东农业大学园艺科学与工程学院作物生物学国家重点实验室	8	167	8.0	8.0
3	毕焕改	山东农业大学园艺科学与工程学院作物生物学国家重点实验室	9	35	2.0	5.0
4	刘培培	山东农业大学园艺科学与工程学院作物生物学国家重点实验室	1	18	1.0	1.0
5	姜振升		1	18	1.0	1.0