CD147慢病毒表达载体的构建及稳定转染A549细胞系的建立

• 作者: 刘晓晴 宋三泰 杨绍兴 汤传昊 王思涵
• 来源期刊: 中国肺癌杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CD147 慢病毒载体 转染 增殖
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 694-700
• 页数: 7页
• 分类号: R734.2
• 字数: 4365字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3779/j.issn.1009-3419.2012.12.03

摘要

背景与目的 CD147是一类位于肿瘤细胞膜表面的跨膜糖蛋白,可促进肿瘤的浸润和转移.本研究拟构建CD147慢病毒表达载体,建立稳定过表达CD147的人肺腺癌A549细胞系,观察过表达CD147后对MMP-9及细胞增殖、侵袭能力的影响.方法 RT-PCR扩增CD147基因全长序列,将序列插入pEGFP载体,构建pEGFP-CD147慢病毒表达载体,随后转入293FT细胞中进行慢病毒包装,用获得的慢病毒毒液感染人肺腺癌细胞系A549,建立稳定过表达CD147的A549细胞系.Real-time PCR检测MMP-9的变化情况,CCK-8及Transwell法检测人肺腺癌细胞增殖、侵袭能力的变化.结果 经限制性内切酶鉴定及测序分析,成功构建了pEGFP-CD 147慢病毒表达载体质粒.Real-time PCR和Western blot检测显示,与对照组相比,转染pEGFP-CD147慢病毒表达载体组的细胞,CD147的表达在mRNA和蛋白两个水平均增高,成功建立了A549-CD147细胞系.上调CD147的表达后,MMP-9的mRNA表达水平明显升高.同时,A549-CD147细胞增殖和侵袭能力明显增加(P＜0.05).结论 成功构建CD147慢病毒表达载体和A549-CD147细胞系,过表达CD 147可上调MMP-9的表达,增强人肺腺癌细胞的增殖和侵袭能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋三泰	军事医学科学院附属医院乳腺肿瘤科	133	1186	17.0	28.0
2	刘晓晴	军事医学科学院附属医院肺部肿瘤科	55	363	11.0	17.0
3	杨绍兴	军事医学科学院附属医院肺部肿瘤科	3	11	2.0	3.0
4	汤传昊	军事医学科学院附属医院肺部肿瘤科	10	45	5.0	6.0
5	王思涵	军事医学科学院附属医院肺部肿瘤科	2	5	1.0	2.0