桶形芋螺毒液蛋白质组分析及二硫键异构酶的鉴定

• 作者: 张容鹄 张本 彭超 罗素兰 长孙东亭 高炳淼
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 蛋白质二硫键异构酶 芋螺毒素 双向电泳 毒液蛋白组学
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 页码范围: 1063-1070
• 页数: 8页
• 分类号: Q512
• 字数: 5730字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1035.2012.01063

摘要

蛋白质二硫键异构酶(PDI)是内质网新生肽链折叠中一个重要的折叠酶.在热带药用海洋生物芋螺的毒液中,富含PDI酶,该酶对于毒液中芋螺毒素神经肽的体内氧化折叠至关重要.研究上样量、水化方式与时间、除盐步骤、聚焦电压和时间、平衡时间、凝胶电泳方法和染色方法等方面,优化并建立了较为理想的芋螺毒液蛋白样品双向电泳的实验条件与方法; 通过双向电泳和MALDI-TOF-MS质谱分析技术,从海南产桶形芋螺(Conus betulinus Linnaeus)毒液蛋白中成功分离鉴定出PDI等9种蛋白; 通过双向电泳和PDQuest软件分析了并比较了三种不同大小桶形芋螺毒液总蛋白的差异性,并质谱鉴定出5个明显的差异蛋白点.研究建立了桶形芋螺毒液蛋白双向电泳分析及质谱鉴定的技术方法,为后续大量分离纯化出天然的芋螺PDI酶以及利用蛋白质组学技术方法深入研究芋螺毒液特征提供了重要的基础.