腺病毒-阴离子脂质体复合物的制备和体外表征

• 作者: 万瑜 孙逊 张志荣 石三军 钟志容
• 来源期刊: 药学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 腺病毒 阴离子脂质体 中心组合设计 钙离子融合法 激光共聚焦 壳蛋白免疫染色 定量聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 药剂学
• 页码范围: 116-123
• 页数: 8页
• 分类号: R943
• 语种: 中文

摘要

为了制备腺病毒-阴离子脂质体复合物(AL-Ad5),首先利用HEK 293细胞大量扩增了带有绿色荧光蛋白报告基因的重组腺病毒,并以氯化铯两步密度梯度离心法进行纯化,再通过细胞病变效应(CPE)法、壳蛋白免疫法和定量聚合酶链反应(Q-PCR)法分别测定腺病毒滴度.以中心组合设计法优化处方和制备条件,通过钙离子融合法制备目标复合物AL-Ad5,以透射电镜和动态光散射法分别对其外观形态、粒径和zeta电位进行考察；并制备双色荧光标记的复合物,通过激光共聚焦技术观察该复合物被MDCK细胞摄取后的胞内定位,以考察阴离子脂质体对腺病毒的包合情况.结果表明,目标复合物分布均匀,粒径和zeta电位分别为(211±10) nm和(-41.2±2.2) mV.激光共聚焦实验结果表明,红色荧光标记的腺病毒和绿色荧光标记的脂质体在MDCK细胞内的定位一致.由此说明,阴离子脂质体能够较好地包裹腺病毒以形成腺病毒-阴离子脂质体复合物.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张志荣		236	2536	28.0	38.0
2	孙逊		50	195	8.0	11.0
3	钟志容		6	25	3.0	5.0
4	万瑜		5	11	2.0	3.0
5	石三军		5	14	2.0	3.0