基于两相预柱的在线二维分离系统用于人肝组织中磷酸肽的规模化鉴定

• 作者: 叶明亮 宋春侠 王方军 程凯 边阳阳 邹汉法
• 来源期刊: 分析测试学报
• 学科: 化学
• 关键词: 在线多维色谱 磷酸肽 蛋白质组学 人肝
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1070-1074
• 分类号: O657.7|O629.73
• 字数: 3906字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-4957.2012.09.008

摘要

将C18反相(RP)填充柱和磷酸基强阳离子交换(SCX)整体柱集成于一体的RP - SCX两相预柱,成功用于RPLC - MS/MS系统的自动进样和SCX分级,完成了磷酸肽在线多维分离平台的构建,可以减少样品的损失,极大地提高了系统的集成化水平和检测灵敏度.对人肝组织酶解液富集的磷酸肽进行规模化鉴定,在假阳率小于1％的情况下,共鉴定到3082条非重复的磷酸化肽段、3056个磷酸化位点和1332个磷酸化蛋白.对所鉴定到的磷酸化蛋白进行了功能分类和激酶分析.该实验结果对于了解蛋白质磷酸化在肝脏组织中发挥的生理学作用具有重要意义.