Raf-1蛋白突变体的原核表达、纯化及活性鉴定

• 作者: 刘小会 刘朗夏 高学娟
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 关键词: Raf-1蛋白 突变体 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1599-1602
• 页数: 4页
• 字数: 2690字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2012.10.008

摘要

目的:将Raf-1蛋白259位丝氨酸(Ser,S)突变成天冬氨酸(Asp,D),构建突变型GST-Raf-1220-268S259D原核表达载体,表达和纯化融合蛋白及鉴定其生物学活性.方法:以pGE X-4T-1-Raf-1220-268为模板,运用PCR定点突变技术扩增出Raf-1220-268S259D基因序列,插入原核表达载体pGEX-6P-1,表达和纯化重组蛋白,GST沉降实验鉴定蛋白的生物学活性.结果:重组质粒测序结果正确,获得模拟磷酸化GST-Raf-1220-268蛋白.GST沉降实验检测到目的蛋白和14-3-3蛋白具有体外特异性结合活性.结论:成功构建GST-Raf-1220-268S259D原核表达载体,并表达及纯化了有生物学活性的融合蛋白,为进一步针对Raf-1的研究提供实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高学娟	暨南大学生命与健康工程研究院	7	1	1.0	1.0
2	刘小会	暨南大学生命与健康工程研究院	8	2	1.0	1.0
3	刘朗夏	暨南大学生命与健康工程研究院	6	1	1.0	1.0