microRNA-34a靶向抑制Notch-1基因对膀胱癌J82细胞增殖和迁移的影响

• 作者: 刘尚文 史涛平 司马晋 姚志勇 张旭 张瑜 张超 朱鸣阳 杨素霞 艾青 马鑫 黄庆波
• 来源期刊: 中华泌尿外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 膀胱肿瘤 癌 miR-34a 基因 靶向抑制
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 210-214
• 分类号: R69
• 字数: 3961字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1000-6702.2012.03.016

摘要

目的 探讨microRN A-34a( miR-34a)通过靶向抑制Notch-1基因表达对人膀胱癌J82细胞增殖和迁移的影响. 方法 查询基因组数据库,应用基因预测软件进行生物信息学分析,预测miR-34a可能靶向调控Notch1基因；实时定量逆转录聚合酶链反应和蛋白印迹法分别检测16例浸润性膀胱癌组织及质粒转染的膀胱癌J82细胞的miR-34a和Notch1表达情况；萤光素酶实验检测miR34a与Notch1基因的结合位点；将miR-34a表达质粒转染J82细胞,新型四唑氮盐化合物比色法和迁移实验评估miR-34a对细胞增殖和迁移的影响. 结果 浸润性膀胱癌组织miR-34a的表达中位数为0.016,四分位数间距0.018；Notch1基因表达中位数为2.765,四分位数间距2.156；癌旁组织miR34a表达中位数为0.042,四分位数间距0.059；Notch1基因表达中位数为2.312,四分位数间距1.365,组间差异均有统计学意义(P＜0.01)；浸润性膀胱癌组织的Notch1蛋白表达量为0.857±0.197,癌旁组织为0.648 ±0.171,组间差异有统计学意义(P＜0.01).质粒转染J82细胞,miR-34a表达质粒组miR-34a的表达量为(2.408±0.789)×10-4,对照质粒组为(0.153±0.029)×10-4(P=0.0026)；miR-34a表达质粒组Notch1基因表达量为3.001±0.106,对照组为4.998±1.053 (P=0.0308)；miR-34a表达质粒组Notch1蛋白表达量为0.747±0.050,对照组为0.988±0.102(P=0.0215)；miR-34a表达质粒组细胞萤光素酶活性为0.422±0.028,对照组为2.392±0.148(P＜0.0001),组间差异均有统计学意义；miR-34a表达质粒组细胞增殖受到抑制,细胞迁移数量为179.3±21.02,对照组为269.7±23.71,组间差异有统计学意义(P=0.0078). 结论 miR-34a可与Notch1基因的3’非翻译区(3'UTR)结合靶向抑制Notch1基因表达,进而抑制了膀胱癌J82细胞的增殖和迁移.