苎麻△1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)基因的克隆和表达分析

• 作者: 周精华 揭雨成 朱守晶 王亮 蒋杰 邢虎成 钟英丽
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 苎麻 P5CS 脯氨酸 干旱 表达分析
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 549-555
• 分类号: S563.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2012.00549

摘要

以耐旱性较强的湘苎3号为材料,从苎麻转录组测序结果中获得了1个与P5CS基因高度相似的Unigene,该片段长1 448 bp,根据该序列设计5′RACE和3′RACE槽式PCR引物,利用RACE结合RT-PCR技术分别克隆得到590 bp的5′端和293 bp的3′端,拼接获得该基因全长cDNA序列.对该序列进行生物信息学分析表明,该基因全长为2 318 bp,其中开放读码框为2 154 bp,编码717个氨基酸,其编码蛋白质的等电点和分子量分别为6.57 kD和77.56 kD,与亚洲棉、麻风树、拟南芥和水稻的P5CS基因的核苷酸序列相似性分别为81％、81％、75％和72％,蛋白质序列的相似性分别为86％、85％、78％和77％,说明该基因与P5CS为同源,被命名为BnP5CS1.半定量RT-PCR分析表明,该基因在苎麻的茎尖中表达量最高,在根中其次,且受干旱胁迫的诱导.P5CS基因是植物体内合成脯氨酸的关键酶基因,BnP5CS1基因的克隆将为苎麻的抗逆分子育种和进一步的功能分析鉴定基础.