发菜NdhK的抗体制备与蛋白表达

• 作者: 王全喜 郭正红 魏兰珍
• 来源期刊: 植物研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 发菜 NdhK 多克隆抗体 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 204-207
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

发菜是一种陆生蓝藻,分布于一些干旱和半干旱区域.其NADPH脱氢酶(NDH-1)是一种重要的光合膜蛋白复合体,参与CO2吸收、围绕光系统Ⅰ的循环电子传递和细胞呼吸.为研究该物种中ndhK基因的功能,本研究利用特异性引物,通过PCR方法从发菜中扩增ndhK基因并克隆到原核表达载体pET-32a上,得到表达载体pET-32a-ndhK,将其转入大肠杆菌BL21( DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,得到分子量大小为43 kDa的融合蛋白NdhK.随后,采用亲和层析,对融合蛋白进行纯化回收,并以此回收蛋白作为抗原进行免疫,制备NdhK的多克隆抗体.最后,利用Western blot蛋白免疫印迹对所得抗体的特异性进行验证.从而为进一步探索发菜ndhK基因的功能以及发菜中NDH-1复合体各亚基的作用进行前期准备.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王全喜		221	1960	21.0	34.0
2	郭正红		4	10	2.0	3.0
3	魏兰珍		12	84	6.0	9.0