人诱导性多潜能干细胞向表皮样干细胞分化的实验研究

• 作者: 余群洪 刘德伍 刘德明 宁璞 彭燕 李勇铁 毛远桂 胡翔 邹永红 邹萍
• 来源期刊: 中华烧伤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 诱导多功能干细胞 细胞分化 表皮样干细胞
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 274-277
• 分类号: R329.28
• 字数: 4232字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2012.04.015

摘要

目的 探讨人诱导性多潜能干细胞( iPSC)向表皮样干细胞分化的可能性.方法 (1)以经过灭活处理的小鼠胚胎Fb株作为滋养层,将人iPSC株接种于其上,加入胚胎干细胞完全培养液培养,Ⅳ型胶原酶消化法传代,倒置相差显微镜下观察人iPSC形态及生长状况并行碱性磷酸酶(AKP)染色.以胚胎干细胞不完全培养液悬浮培养iPSC,观察拟胚体形成能力.(2)将人iPSC接种于铺有人羊膜的6孔培养板培养,设为诱导组;另于未铺羊膜的6孔培养板上培养iPSC,作为对照组.观察2组iPSC形态,免疫细胞化学染色法检测整合素β1和细胞角蛋白19( CK19)表达.结果 (1)人iPSC在胚胎干细胞完全培养液中呈典型的干细胞克隆状生长,边界清楚,增殖旺盛;AKP染色阳性.iPSC在无滋养层条件下悬浮培养可形成拟胚体.(2)诱导组iPSC经培养4d后形成干细胞克隆,部分细胞整合素β1和CK19表达阳性.对照组细胞大量死亡,未见整合素β1和CK19表达.结论 人iPSC在羊膜诱导下可定向分化为表皮样干细胞,有望成为皮肤组织工程新的种子细胞.