Bt毒素诱导下小菜蛾实时定量PCR内参基因的筛选

• 作者: 吴青君 张卓 张友军 王少丽 符伟 谢文
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 小菜蛾 实时定量PCR 内参基因 抗药性 Bt毒素
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 简报
• 页码范围: 1406-1412
• 分类号: Q966
• 语种: 中文

摘要

[目的]筛选出Bt毒素诱导后的小菜蛾Plutella xylostella(L.)的实时定量PCR最适内参基因.[方法]选取核糖体18S rRNA (18S rRNA)、肌动蛋白(ACTB)、延伸因子(EF1)、3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)、核糖体蛋白L32 (RPL32)、核糖体蛋白S13 (RPS13)、核糖体蛋白S20 (RPS20)和β-微管蛋白(TUB)基因作为候选内参基因,以geNorm、Normfinder和BestKeeper软件分析这8个基因在Bt毒素诱导后的小菜蛾不同品系中肠组织中的表达稳定性.并应用筛选出来的内参基因分析小菜蛾氨肽酶2(aminopeptidase N2,APN2)基因的表达水平.[结果]geNorm软件以RPS13和EF1为最稳定内参基因,NormFinder和BestKeeper软件均以RPS13和RPL32为最稳定基因.使用3种不同内参基因分析Bt毒素诱导后的小菜蛾Bt抗性和敏感品系中ANP2表达水平时,新的内参基因EF1和传统内参基因RPL32表现了良好的稳定性,二者作为标准化因子,ANP2表达量结果基本一致,而使用18SrRNA作为内参基因,却导致部分表达量分析结果有所误差.[结论]筛选出PRS 13,RPL32和EF1可以作为小菜蛾某些试验条件下的内参基因,对小菜蛾基因表达研究奠定了一定基础,也对其他昆虫内参基因的筛选具有参考价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴青君	中国农业科学院蔬菜与花卉研究所	149	3548	32.0	54.0
2	张友军	中国农业科学院蔬菜与花卉研究所	224	4315	34.0	55.0
3	王少丽	中国农业科学院蔬菜与花卉研究所	93	861	17.0	24.0
4	符伟	湖南农业大学农药研究所	12	90	6.0	9.0
7	谢文	中国农业科学院蔬菜与花卉研究所	46	440	11.0	18.0
11	张卓		7	26	2.0	5.0