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摘要:
目的 利用Taqman技术,建立荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)方法,对肺癌组织中Ⅳ型胶原α3链[α3 (Ⅳ)] mRNA表达进行定量及蛋白表达水平检测,评价其临床应用价值.方法 在α3(Ⅳ)基因NC1结构域编码序列设计一对引物和一条Taqman探针;优化反应体系的条件,以不同质粒DNA含量为标准品和其循环阈值(Ct值)制作标准曲线,检测肺癌组织中α3(Ⅳ) mRNA含量;并对本方法进行方法学评价.Western blot法检测tumstatin蛋白表达情况.结果 成功建立了α3(Ⅳ)基因mRNA表达实时荧光定量PCR检测方法,检测灵敏度为800 拷贝/μl;在10.3~10.8 拷贝/μl之间与Ct值具有很好的线性关系;PCR扩增效率为99 4%;肺癌组织中α3(Ⅳ) mRNA表达定量检测发现,48例肺癌患者肺癌组织α3(Ⅳ) mRNA组含量显著低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.01),肺癌组织中tumstatin蛋白表达下调/缺失率显著高于癌旁组织(P<0.01).临床监测发现肺癌患者癌组织α3(Ⅳ) mRNA含量检测和TNM分期程度具有相关性(P<0.05).结论 α3(Ⅳ)与肺癌的发生发展关系密切,FQ-RT-PCR检测α3(Ⅳ) mRNA的表达为肺癌转移、预后判断、临床治疗等奠定良好基础.
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文献信息
篇名 肺癌组织α3(Ⅳ)基因表达及其临床研究
来源期刊 安徽医科大学学报 学科 医学
关键词 肺癌 基因表达 Ⅳ型胶原α3链
年,卷(期) 2012,(1) 所属期刊栏目 临床医学研究
研究方向 页码范围 48-52
页数 分类号 R73|R341
字数 4833字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1000-1492.2012.01.014
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 赵亮 安徽医科大学附属省立医院检验科 20 62 5.0 6.0
2 罗以勤 安徽医科大学附属省立医院检验科 27 130 7.0 10.0
3 聂江玲 安徽医科大学附属省立医院检验科 5 21 3.0 4.0
4 姚丽娟 安徽医科大学附属省立医院检验科 18 81 6.0 8.0
5 周明 安徽医科大学附属省立医院检验科 8 32 3.0 5.0
6 董行 安徽医科大学附属省立医院检验科 8 29 3.0 5.0
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研究主题发展历程
节点文献
肺癌
基因表达
Ⅳ型胶原α3链
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
安徽医科大学学报
月刊
1000-1492
34-1065/R
大16开
合肥市梅山路安徽医科大学校内
26-36
1955
chi
出版文献量(篇)
7450
总下载数(次)
15
总被引数(次)
37040
相关基金
安徽省自然科学基金
英文译名:Anhui Provincial Natural Science Foundation
官方网址:http://www.ahinfo.gov.cn/zrkxjj/index.htm
项目类型:安徽省优秀青年科技基金
学科类型:
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