摘要:
背景 研究表明细胞因子在角膜移植免疫调节中起重要的作用,但关于角膜移植术后角膜植片内细胞因子表达的变化报道较少. 目的 探讨角膜移植术后不同时间点细胞因子的表达变化. 方法 采用雌性6~8周龄BALB/c小鼠及C57BL/6小鼠分别建立小鼠自体角膜移植和同种异体角膜移植模型,每组各10只,自体角膜移植术组供体和受体同为BALB/c小鼠,同种异体角膜移植术组供体为C57 BL/6小鼠,受体为BALB/e小鼠.于术后1d开始临床观察角膜植片并对炎症程度进行评分,当植片评分总和≥5分或植片混浊≥2分时为发生植片排斥反应.将BALB/c小鼠随机分为正常对照组3只和同种异体角膜移植术组15只,后者分别于术后6h及1、3、7、14 d对角膜植片行逆转录PCR(RT-PCR)检测植片中细胞因子白细胞介素4 (IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)、IL-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的变化.结果 在60 d的观察期中,自体角膜移植术后小鼠角膜植片混浊评分均<2分,植片的炎症评分之和均<5分,植片存活率为100%,但同种异体角膜移植术后角膜植片水肿、混浊,伴有角膜新生血管形成,至术后24 d角膜植片排斥反应评分之和均≥5分,植片混浊评分≥2分,全部发生排斥反应,角膜植片平均存活时间为(17.80±4.66)d.RT-PCR检测结果表明,正常角膜中IL-4和IFN-γ呈阳性表达,IL-10和TNF-α表达阴性.同种异体角膜移植术后6h可检测到IL-4呈阳性表达,IFN-γ和IL-10表达呈强阳性,而未检测到TNF-α的表达.术后1~3d角膜植片中IL-4呈强阳性表达,IFN-γ阳性表达,TNF-α表达增强,IL-10表达逐渐消失.角膜移植术后7d,可见IL-4表达阴性,而IFN-γ、IL-10和TNF-α仍呈强阳性表达.至术后14d,角膜植片中IL-4、IFN-γ和TNF-α均未见表达,仅检测到IL-10呈阳性表达.结论 TNF-α是角膜移植术后局部参与调控的主要因子.