微小RNA-21反义寡核苷酸对宫颈鳞癌SiHa细胞株细胞生物学特性影响的体内外实验研究

• 作者: 张石芬 彭全洲 成志强 王晓玫 胡锦涛 许静 金红涛 高利昆
• 来源期刊: 中华病理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 宫颈肿瘤 微RNAs 细胞系 寡核苷酸类,反义 细胞增殖 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 实验病理学
• 页码范围: 254-259
• 分类号: R36
• 字数: 6069字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0529-5807.2012.04.009

摘要

目的 探讨体内外微小RNA-21( miR-21)反义寡核苷酸对宫颈鳞癌SiHa细胞株绌胞生物学特性的影响.方法 miR-21反义寡核苷酸(miR-21-ASO)通过脂质体转染宫颈鳞癌SiHa细胞,即时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR -21表达情况,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法、集落形成实验、流式细胞术等方法探讨抑制miR-21表达对SiHa细胞形态及生物学特性改变的影响.应用免疫组织化学MaxVision法、TUNEL( TdT-mediated dUTP nick end labeling)细胞凋亡检测试剂盒检测移植瘤细胞增殖活性和凋亡情况.结果 miR-21在SiHa细胞株中呈显著高表达,miR-21-ASO可使SiHa细胞中miR-21表达量显著降低(P＜0.05).MTT法检测结果显示,转染miR-21 -ASO后SiHa细胞的生长受到明显抑制(P＜0.05).阴性对照组的细胞集落形成率为98.3％±2.0％,miR-21抑制组则为55.6％±1.4％,miR-21抑制组的细胞集落形成率受到明显抑制(P＜0 05).流式细胞术检测显示,阴性对照组和miR-21抑制组的SiHa细胞凋亡率分别为6.7％±1.3％和29.4％±1.7％,miR-21抑制组的细胞凋亡率明显增加(P＜0.05).裸鼠皮下移植瘤成瘤率,miR-21抑制组与阴性对照组的成瘤比例分别为3/8和6/8(P ＜0.05).裸鼠瘤体的Ki-67阳性指数,miR-21抑制组(42％)比阴性对照组(90％)显著下降.荧光TUNEL凋亡检测显示,miR-21抑制组裸鼠肿瘤细胞凋亡明显增多(P＜0.05).结论 miR-21-ASO可有效抑制宫颈鳞癌SiHa细胞中miR-21表达,影响癌细胞增殖活性,促进癌细胞凋亡,体内抑制SiHa细胞裸鼠移植瘤生长促进其凋亡.