沉默血小板反应蛋白-1基因对亚溶解型C5b-9诱导肾小球系膜细胞分泌细胞外基质的影响

• 作者: 周建博 李妍 王迎伟 赵聃 邱文
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 肾小球系膜细胞 亚溶解型C5b-9复合物 血小板反应蛋白-1 细胞外基质 小发夹RNA
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 29-34,47
• 分类号: R692
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8259.2012.01.007

摘要

目的 研究沉默血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)基因对于亚溶解型(sublytic) C5 b-9复合物诱导大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)分泌细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的影响.方法 设计合成针对TSP-1基因4个靶点的小发夹RNA(small hair RNA,shRNA),并构建相应的表达质粒,筛选沉默效率最佳的TSP 1 shRNA(shTSP-1)后,将shTSP 1转染体外培养的大鼠GMC,再给予sublytic C5b-9刺激.以Westernblot检查TSP-1、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)及Ⅳ型胶原蛋白(collagenⅣ)的表达情况.另用ELISA法测定培养上清中总转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和活化TGF-β1的含量.结果 核酸序列分析证明,4种TSP-1 shRNA重组质粒均构建成功.Western blot实验证实,构建的shTSP- 1-3 (Thbs1-3)具有最佳的沉默效率.将shTSP-1-3转染大鼠GMC后,在沉默TSP-1基因表达的同时,能明显抑制由sublytic C5b 9诱导的TGF-β1活化及细胞外基质(FN和collagenⅣ)的合成.结论 TSP-1基因表达在sublytic C5b-9刺激大鼠GMC诱导TGF-β1活化及ECM分泌的过程中,发挥了重要的促进作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李妍	南京医科大学微生物学与免疫学系	27	79	4.0	8.0
2	王迎伟	南京医科大学微生物学与免疫学系	49	239	9.0	14.0
3	邱文	南京医科大学微生物学与免疫学系	26	30	3.0	5.0
4	周建博	南京医科大学微生物学与免疫学系	6	0	0.0	0.0
5	赵聃	南京医科大学微生物学与免疫学系	21	11	2.0	3.0