抑制牛整合素β5基因表达的shRNA的筛选

• 作者: 何洪彬 刘晓 宋玲玲 朱其军 武建明 王洪梅 王浩然 王立群
• 来源期刊: 家畜生态学报
• 学科: 农学
• 关键词: 整合素β5 真核表达 shRNA Western blot
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 科学研究
• 页码范围: 20-24
• 分类号: S811.6
• 字数: 2932字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-1182.2012.02.005

摘要

根据牛整合素β5 (Integrin Bata5,ITGB5)的基因序列,设计并构建了真核表达载体pcDNA3.1-flag-β5和shRNA重组慢病毒载体H1-shRNA145、H1-shRNA726,利用脂质体介导法,将pcDNA3.1-flag-β5分别和H1-shRNA145、H1-shRNA726共转染293T细胞,并以针对LacZ基因的H1-shRNA-LacZ与pcDNA3.1-flag-β5共转染293T细胞作为对照,以持家基因β-actin为蛋白内参,通过Western blot检测ITGB5的表达,结果表明,H1-shR-NA145、H1-shRNA726均可抑制ITGB5的表达,并有剂量效应,为进一步研究ITGB5的基因功能奠定基础.