采用酵母双杂交技术研究OsRUS1与OsRUS2.1之间的相互作用

• 作者: 侯学文 潘家强
• 来源期刊: 植物生理学报
• 关键词: OsRUS 酵母双杂交 相互作用 自激活
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1050-1056
• 页数: 7页
• 语种: 中文

摘要

为了研究OsRUS1 (ROOT UV-B SENSITIVE1)与OsRUS2.1 (ROOT UV-B SENSITIVE 2.1)之间是否具有相互作用以及通过何种结构域相互作用,采用酵母双杂交技术开展了如下工作.根据对OsRUS1与OsRUS2.1的DUF647结构域分布的分析,分别采用分子克隆技术将OsRUS1的4个不同片段[OsRUS1 (1～1782)、OsRUS1(1～504)、OsRUS1(510～1 282)和OsRUS1(1188～1782)]克隆到诱饵载体pGBKT7上,并将OsRUS2.1的4个不同片段[OsRUS2.1(1～1317)、OsRUS2.1(1～138)、OsRUS2.1 (139～879)和OsRUS2.1(880～1 317)]克隆到猎物载体pGADT7上,酶切和测序结果表明诱饵和猎物载体构建成功,读码框正确.将所构建的4个OsRUS1诱饵载体和4个OsRUS2.1猎物载体质粒依次转化酵母AH109,研究转化AH109菌落在营养缺陷型培养液SD-Trp-DO或SD-Leu-DO上的生长情况,以及对报告基因ADE、HIS、MEL1和LacZ的激活情况,表明它们均没有对酵母菌株AH109产生毒性和自激活活性.再将4个OsRUS1诱饵载体和4个OsRUS2.1猎物载体的16种组合分别共转化酵母AH109,共转化菌株能在二缺营养缺陷板SD-Trp-Leu-DO上生长良好,但不能在四缺营养缺陷板SD-Trp-Leu-Ade-His-DO上生长,也不能激活MEL1和LacZ报告基因.这些结果表明OsRUS1与OsRUS2.1之间没有直接的相互作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘家强		82	235	7.0	12.0
2	侯学文		30	365	11.0	18.0