内含子A提高分枝杆菌热休克蛋白65DNA疫苗的免疫原性

• 作者: Douglas B.Lowrie 吴娟 曲勍 罗玉萍 范小勇 马辉
• 来源期刊: 中华预防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 内含子 疫苗,DNA 免疫 热休克蛋白质类
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 58-63
• 分类号: R1
• 字数: 4684字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2012.01.015

摘要

目的 探讨以内含子A增强外源抗原在真核细胞中的表达效率及其对DNA疫苗在小鼠中免疫原性的影响.方法 以分枝杆菌热休克蛋白65 (Hsp65)为模式抗原,将其分别克隆入含有内含子A和不含内含子A的真核表达载体pCMV4.0和pVAX1,将表达Hsp65的不同重组质粒瞬时转染人胚肾上皮细胞系293T并免疫接种BALB/c小鼠,应用ELISA分析其所诱导产生的抗原特异性抗体水平及亚类,并以酶联免疫斑点试验(ELISPOT)和胞内细胞因子染色技术(ICS)分析其诱导产生的细胞免疫应答反应.结果 含有内含子A的重组表达质粒pCMV4.0hsp65较之不含内含子A的pVAX1 hsp65在293T细胞中的抗原表达量更高,免疫小鼠6周后诱导产生的抗-Hsp65特异性总IgG抗体水平(3.76 ±0.23对3.15 ±0.22,P＜0.01)和IgG2a/IgG1比值(4.08 ±0.04对2.23±0.12,P＜0.01)也更高,差异有统计学意义；分泌γ-干扰素(IFN-γ)的CD4+T淋巴细胞频率[(2.0±0.058)％对(1.5±0.087)％,t=4.804,P＜0.01]和CD8+T淋巴细胞频率[(0.6±0.058)％对(1.0±0.115)％,t=3.098,P＜0.05]增加,差异有统计学意义,提示其诱导产生了增强的Th1型免疫应答.结论 内含子A可增强分枝杆菌Hsp65在真核细胞中的表达效率并可提高DNA疫苗在小鼠中的免疫原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗玉萍	南昌大学生命科学与食品工程学院	55	847	15.0	28.0
2	马辉	复旦大学附属上海市公共卫生临床中心科学研究部	7	20	3.0	4.0
3	曲勍	复旦大学附属上海市公共卫生临床中心科学研究部	3	1	1.0	1.0
4	Douglas B.Lowrie	复旦大学附属上海市公共卫生临床中心科学研究部	2	1	1.0	1.0