羊口疮病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 姚俊 张乔明 彭海生 李华春 李富祥 鲁富有
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 羊口疮病毒 TaqMan 实时荧光定量PCR 建立 应用
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 31-36
• 页数: 6页
• 分类号: S852.654
• 字数: 5250字
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank中的羊口疮病毒基因组(AY386264) ORFVgORF121及ORFVgORF122基因的DNA序列,应用Beacon Designer 7.7软件设计一对引物和一条TaqMan探针,以含有该引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了羊口疮病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法.该方法组内及组间重复试验变异系数均低于2％,上机检测时间不超过40 min,检测灵敏度达1×101 copies/μL,山羊痘及禽痘病毒特异性检测均为阴性,标准曲线的相关系数(R2)为0.998 088,线性关系良好.应用该方法对云南保山和普洱送检的羊口疮临床组织病料进行绝对定量检测,送检样品抽提DNA中病毒拷贝数分别为1.35×108 copies/μL和9.62×107 copies/μL.结果表明,研究建立的羊口疮病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法具有特异、灵敏、稳定、快速和安全的特点,适于羊口疮临床组织样品的早期检测及常规病原监测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李华春	云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室	72	264	8.0	11.0
2	彭海生		14	22	3.0	4.0
3	姚俊	云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室	27	126	7.0	9.0
4	李富祥	云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室	39	106	7.0	7.0
5	鲁富有		12	20	3.0	4.0
6	张乔明		5	7	1.0	2.0