HIV-1B｀/C、A/E重组亚型pol基因DNA疫苗的构建及其免疫原性研究

• 作者: 万延民 仇超 任晓楠 任艳琴 徐建青 王婧 胡志东
• 来源期刊: 中华预防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HIV 疫苗,DNA T淋巴细胞 Pol蛋白
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 551-555
• 分类号: R174.6
• 字数: 3872字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2012.06.016

摘要

目的 构建表达中国B｀/C和A/E重组亚型HIV-1 pol基因的DNA疫苗,并比较其免疫原性.方法 按哺乳动物密码子使用频率对HIV-1 CN54( BVC重组亚型)与AE2f( A/E重组亚型)的pol基因进行序列优化,构建DNA疫苗,通过Western blotting验证其体外表达效率.通过肌肉注射途径免疫小鼠,然后无菌分离小鼠脾淋巴细胞并分别在Consensus B Pol和HIV-I AE2f Pol肽库刺激下,采用酶联免疫斑点技术(ELISPOT)检测抗原特异性IFN-γ的分泌情况,观察比较两个DNA疫苗免疫原性特征.结果 DNA测序结果表明两个pol基因重组质粒构建正确,且两个DNA疫苗均能在体外有效表达.Consensus B Pol肽库刺激后,pSVAE-Pol活化的总T细胞免疫反应为(636±178)个斑点形成细胞数/106个脾淋巴细胞,pSVCN-Pol活化的总T细胞免疫反应为(468±265)个斑点形成细胞数/106个脾淋巴细胞(P=0.412)；HIV-1 AE2f Pol肽库刺激后,pSVAE-Pol活化的总T细胞免疫反应为(1378±611)个斑点形成细胞数/106个脾淋巴细胞,pSVCN -Pol活化的总T细胞免疫反应为(713±61)个斑点形成细胞数/106个脾淋巴细胞(P =0.134).将总T细胞反应按肽池分解后发现,pSVAE-Pol活化的特异性T细胞反应主要集中于Pol1肽池；而pSVCN-Pol除了能够活化针对Pol 1的T细胞反应之外,也可以较好地活化针对Consensus B Pol 2肽池的T细胞反应.结论 两个亚型Pol DNA疫苗中以AE-Pol的免疫原性更强,但其所活化的T细胞表位识别谱不及CN-Pol广泛.HIV-1疫苗可能需将两者结合在一起.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐建青	上海市公共卫生临床中心科学研究部	31	38	4.0	5.0
3	万延民	上海市公共卫生临床中心科学研究部	7	6	1.0	2.0
4	王婧	上海市公共卫生临床中心科学研究部	2	1	1.0	1.0
5	任艳琴	上海市公共卫生临床中心科学研究部	2	1	1.0	1.0
6	任晓楠	上海市公共卫生临床中心科学研究部	8	14	2.0	3.0
9	仇超	复旦大学生物医学研究院	12	15	2.0	3.0
10	胡志东	上海市公共卫生临床中心科学研究部	1	1	1.0	1.0