Bmi-1 siRNA对宫颈癌Hela细胞体外增殖能力的影响

• 作者: 刘丹丹 刘奔 刘纯青 姜悦 孟秀香 张艳丽 赵宝霞 赵心宇 魏巍
• 来源期刊: 大连医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: Bmi-1基因 沉默 Hela细胞 增殖
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 109-114
• 分类号: R73-3
• 字数: 3590字
• 语种: 中文

摘要

[目的]观察siRNA沉默Bmi-1表达对Hela细胞增殖能力的影响.[方法]构建了表达Bmi-1 siRNA的重组真核表达载体,将其转染入Hela细胞,利用荧光法观察转柒效率.用RT-PCR及Western blot方法检测转染后细胞Bmi-1 mRNA及Bmi-1蛋白的表达情况；用MTT比色法、台盼蓝拒染法检测Bmi-1 siRNA对Hela细胞增殖的抑制作用；用流式细胞仪分析各组细胞的细胞周期；用平板克隆形成实验检测Bmi-1 siRNA对Hela细胞的单细胞增殖能力的影响；应用免疫细胞化学(SP法)及Western blot法检测各组细胞Ki-67及CyclinD1的表达.[结果]将构建好的重组质粒成功转染进入了Hela细胞中且转染效率在90％左右；Bmi-1 siRNA转染Hela细胞Bmi-1 mRNA及Bmi-1蛋白表达沉默,Bmi-1表达沉默后抑制Hela细胞增殖并使细胞周期阻滞于G0-G1期,能明显抑制Hela细胞的单细胞增殖能力；同时Ki-67及CyclinD1的表达均明显下降.[结论]siRNA介导的Bmi-1基因的表达沉默能抑制Hela细胞的增殖能力,Bmi-1表达可能与宫颈癌的发生发展相关.