实用WSSV定量检测方法的建立及其应用于脊尾白虾病毒感染规律的研究

• 作者: 周俊芳 房文红 朱磊 李新苍 王元 董建波
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 脊尾白虾 白斑综合征病毒 检测与定量 感染规律
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 页码范围: 1554-1562
• 分类号: Q175|S945.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1231.2012.28164

摘要

为优化当前白斑综合征病毒( WSSV)定量检测方法,实验结合当前WSSV诊断与定量方法应用的实际,试图通过设计两对普通PCR引物来建立一种实用的WSSV绝对定量方法,并利用此方法进一步探明WSSV在脊尾白虾体内的增殖规律及致病性.首先根据WSSV的囊膜蛋白VP28基因序列设计了两对特异引物(F1,R1)和(RF2,RR2),分别用于标准品质粒的构建和扩增子的扩增,以开展SYBR Green染料法定量检测WSSV的研究；随后利用该定量检测方法分析了WSSV在脊尾白虾体内的组织分布及感染规律.研究结果显示:(1)以定量引物RF2和RR2建立的SYBR Green绝对定量检测方法具有敏感度高、特异性强、定量范围广且准确等特点；(2)WSSV能感染脊尾白虾鳃、肝胰腺、肌肉、头胸甲下结缔组织、胃及肠等组织,其中头胸甲下结缔组织病毒含量最高(1.1×107 copies/μg),其次是鳃组织(4.1×106copies/μg)；正常脊尾白虾感染WSSV,首先经过一个约48 h潜伏期,而后开始大量增殖并造成部分虾死亡,死亡率约为20％.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	房文红	中国水产科学研究院东海水产研究所农业部东海与远洋渔业资源开发利用重点实验室	55	657	14.0	24.0
2	周俊芳	中国水产科学研究院东海水产研究所农业部东海与远洋渔业资源开发利用重点实验室	10	90	6.0	9.0
3	李新苍	中国水产科学研究院东海水产研究所农业部东海与远洋渔业资源开发利用重点实验室	5	44	4.0	5.0
4	朱磊	中国水产科学研究院东海水产研究所农业部东海与远洋渔业资源开发利用重点实验室	1	14	1.0	1.0