Exendin-4介导的猪髋动脉内皮细胞NO释放与细胞内钙离子浓度变化的关系

• 作者: 刘浩宇 张冬颖 胡小春 覃数
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 一氧化氮 内皮细胞 胰高血糖素样肽-1受体激动剂
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 859-863
• 分类号: R322.121|R329.26|R977.15
• 语种: 中文

摘要

目的 观察Exendin-4(Ex-4)介导的猪髋动脉内皮细胞(PIEC)内一氧化氮(NO)释放与钙离子变化的关系,探讨Ex-4影响内皮细胞功能的机制.方法 免疫荧光法检测确认PIEC上存在胰高血糖素样肽-1受体(GLP-IR).NO荧光探针(DAF-FM DA)标记细胞内NO,荧光酶标仪检测Ex-4作用内皮细胞后不同时间点[加药前(0h),加药后l、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12h,共13个时点]细胞内NO释放情况；钙离子荧光探针(Fura-2 AM)标记细胞内钙,荧光酶标仪检测细胞内3个不同时段(0～30min,4～4.5h,8～8.5h)钙浓度变化情况；评价Ex-4诱导PIEC释放NO与细胞内钙的关系.结果　PIEC上有GLP-1R表达.Ex-4引起PIEC内NO增加,且有时间依赖关系,与0h比较,4h开始NO明显增高(P＜0.05),8h时细胞内NO含量较其他各时点均明显增高(P＜0.05).Ex-4干预后0～30min、4～4.5h和8～8.5h 3个时段细胞内钙均较对照组高(2.042±2.115 vs 0.634±0.352,P＜0.01；0.413±0.154 vs 0.113±0.111,P＜0.01;0.309±0.133 vs 0.063±0.120,P＜0.01).Ex-4干预PIEC后NO释放前期前段(0～30min),细胞内钙逐渐上升(拟合曲线:y=0.106x+l.326); NO释放中期前段(4～4.5h,y=0.003x+0.374)和NO释放后期前段(8～8.5h,y=-0.001x+0.324)细胞内钙浓度虽同NO一样也高于对照组,但没有明显的变化趋势.结论 Ex-4可增加内皮细胞内NO释放,该过程与细胞内钙变化密切相关.