乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA与松弛环状DNA对核苷(酸)类药物耐药变异的比较

• 作者: 倪武 徐文胜 缪晓辉 赵克开 陈建山
• 来源期刊: 中华传染病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒 乙型 DNA,环状 核苷酸类 抗药性,病毒 变异(遗传学)
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 临床论著
• 页码范围: 38-42
• 分类号: R4
• 字数: 4057字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1000-6680.2012.01.009

摘要

目的 了解肝细胞内HBV共价闭合环状DNA( HBV cccDNA)核苷(酸)类药物耐药变异的情况,并比较其与松弛环状DNA(rcDNA)耐药变异的异同.方法 取40例慢性HBV感染肝移植患者的部分肝组织,采用十二烷基硫酸钠-蛋白质沉淀法结合DNA提取试剂盒分离提取肝内的HBV cccDNA和rcDNA.将抽提产物用不降解质粒的ATP依赖DNA酶酶切纯化后,用跨HBV基因组双链缺口并涵盖常见核苷类耐药位点(rt169～rt250)的引物行单轮PCR或套式PCR选择性扩增cccDNA.另用不跨双缺口的引物PCR扩增肝组织内的HBV rcDNA和患者肝移植术前的血清HBV rcDNA.用直接测序法对上述扩增产物进行基因测序并分析核苷(酸)类药物耐药位点的检出情况.结果 40例患者中,31例肝组织内检测到HBV cccDNA,35例肝组织检测到HBV rcDNA,21例肝移植术前血清中检测到HBV rcDNA.测序结果显示,2例肝组织内cccDNA、rcDNA和血清rcDNA均检测到rtM204Ⅰ变异；有2例患者肝内cccDNA、rcDNA分别存在rtM204Ⅰ、rtQ215H变异,而血清rcDNA未检测到相应变异；3例血清中分别存在rtM204V、rtM204V、rtV173L+ rtL180M+rtM204V变异,而肝内cccDNA和rcDNA未检测到相应变异.结论 慢性HBV感染者肝细胞内cccDNA可出现核苷(酸)类药物耐药变异,且肝组织内的cccDNA、rcDNA耐药变异株与血清中的rcDNA耐药变异株不完全一致.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	缪晓辉	第二军医大学附属长征医院感染科	137	517	14.0	20.0
2	徐文胜	第二军医大学附属长征医院感染科	24	161	7.0	12.0
3	倪武	第二军医大学附属长征医院感染科	31	173	7.0	12.0
4	赵克开	山东省威海市解放军第四○四医院感染科	2	0	0.0	0.0
5	陈建山	第二军医大学附属长征医院感染科	1	0	0.0	0.0