地衣芽胞杆菌ATCC9945A中γ-聚谷氨酸降解酶基因的克隆、表达及降解性能鉴定

• 作者: 施庆珊 欧阳友生 王计伟 胡文锋 陈仪本
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 地衣芽孢杆菌ATCC9945A γ - PGA降解酶基因 克隆表达 降解性能
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 13-18
• 分类号: Q812
• 字数: 4316字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2012.01.005

摘要

目的:验证在地衣芽胞杆菌ATCC9945A中存在着γ-聚谷氨酸降解酶基因(ywtD),为下一步解决在γ-聚谷氨酸微生物发酵合成过程中产物γ - PGA降解的技术性难题提供依据.方法:通过在pET -28b(+)大肠杆菌表达系统克隆表达地衣芽孢杆菌ATCC9945A中的ywtD基因,对诱导表达条件进行优化,采用SDS- PAGE和Western Blot方法检测目的蛋白的表达,并体外酶解实验验证其活性.结果:PCR扩增得到了一个1 245bp的基因片段,预期编码414个氨基酸,诱导表达后得到一个分子量大小约为45.6 kDa的表达产物.Western Blot分析结果表明ywtD基因得到了有效表达.体外酶解实验表明该表达产物具有降解γ - PGA的活性.结论:证明在地衣芽胞杆菌ATCC9945A中存在着γ-聚谷氨酸降解酶基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡文锋	华南农业大学食品学院	55	518	11.0	21.0
2	施庆珊		65	943	18.0	28.0
3	欧阳友生		84	1274	20.0	32.0
4	王计伟		2	46	2.0	2.0