降钙素基因相关肽对血管内皮细胞体外血管生成的作用及机制研究

• 作者: 周健 夏立恒 张永涛 张鑫鑫 文军 王钊 郭小磊 金丹 陀泳华
• 来源期刊: 中华骨科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 降钙素基因相关肽 脐静脉 内皮细胞 组织工程 骨
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 781-787
• 分类号: R329.2
• 字数: 5401字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-2352.2012.08.013

摘要

目的 观察降钙素基因相关肽(calcitonin-gene-related peptide,CGRP)对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的成血管作用,初步探讨其在骨组织工程中的应用价值.方法 体外分离获取HUVECs,采用细胞免疫荧光检测其CGRP受体l的表达.体外成管实验检测CGRP的成血管作用,ELISA法检测CGRP直接作用于HUVECs时血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的分泌水平.Q-PCR检测CGRP刺激HUVECs不同时间点VEGF、VEGF受体1(FLT1)、VEGF受体2(KDR)及CGRP受体1 mRNA的表达,Western blot检测HUVECs不同时间点FLT1、KDR的蛋白表达.结果 细胞免疫荧光显示HUVECs表达CGRP受体1,体外成管实验显示CGRP有明显的成血管作用.ELISA显示CGRP能明显促进HUVEC分泌VEGF.Q-PCR结果显示不同浓度组CGRP受体1 mRNA的表达较对照组增高,且在第10天最为明显;Q-PCR及Western blot结果显示不同浓度组FLT1、KDR mRNA和蛋白的表达在各时间点较对照组均增高.结论 CGRP能明显促进HUVECs的体外生成血管,可能与其促进VEGF分泌,增强HUVECs的FLT1与KDR表达有关;同时,CGRP受体表达也增加,可进一步增强CGRP的促血管生成作用.