芹菜过敏原蛋白Api g1.02的克隆、表达及单抗制备

• 作者: 吴亚君 李刚 杨海荣 王海艳 袁飞 陈颖
• 来源期刊: 中国食品学报
• 学科: 医学
• 关键词: 芹菜过敏原蛋白Apig1.02 克隆 蛋白表达 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 食品安全与检测
• 页码范围: 144-148
• 分类号: R155.5
• 字数: 3483字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-7848.2012.05.023

摘要

提取芹菜总RNA,反转录PCR (RT-PCR)扩增出过敏原蛋白Api g1.02基因,经PCR、酶切和序列测定后,得到重组质粒pET-32a- Api g1.02.将重组质粒转化到BL21 (DE3)pLys感受态细胞中,用1mmol/L异丙基硫代-B-D-半乳糖苷(IPTG)对转化菌进行诱导表达及SDS-PAGE分析后,将表达蛋白提取纯化,制备单克隆抗体并进行Western blot分析.结果表明芹菜过敏原蛋白Api g1.02在体外获得了高效表达,表达融合蛋白分子质量约35 ku,诱导6h后表达量最高,占菌体总蛋白的40％左右；制备的单克隆抗体能与表达蛋白发生免疫印迹反应,说明所表达的蛋白具有良好的免疫原性.该研究结果为建立芹菜过敏原蛋白的免疫学检测方法奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈颖		152	1036	16.0	21.0
2	吴亚君		49	426	11.0	18.0
3	王海艳		21	130	5.0	11.0
5	袁飞		36	231	9.0	14.0
6	李刚		7	31	3.0	5.0
7	杨海荣		22	87	6.0	9.0