无血清和含胎牛血清培养基培养的脐带间充质干细胞生物学特性比较研究

• 作者: 乔曼 乔淑敏 刘慧文 吴德沛 孙爱宁 杨婷 田竤 薛胜利 陈峰 陈广华 陈志哲
• 来源期刊: 中华血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脐带间充质干细胞 胎牛血清 无血清培养基 异种蛋白
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 715-719
• 分类号: R446.11
• 字数: 4120字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-2727.2012.09.006

摘要

目的 比较无血清及含胎牛血清培养基培养的人脐带间充质干细胞(UC-MSC)生物学特性,寻求无血清的UC-MSC培养方法.方法 采用胶原酶消化脐带小块.分别采用MesenCult-XF无血清培养基和含胎牛血清的aMEM完全培养基培养UC-MSC.比较两种方法培养的早期UC-MSC细胞形态、免疫表型、增殖分化潜能、核型及对T淋巴细胞增殖抑制作用的差异.结果 用无血清培养基培养制备的悬浮UC-MSC平均细胞直径为26(18～39)μm,含血清完全培养基制备的悬浮UC-MSC平均细胞直径为35(20～61)μm.早期UC-MSC采用无血清培养基培养时连续传代可倍增(5.2±0.2)倍,而采用含胎牛血清的完全培养基培养时传代可倍增(3.5±0.1)倍,UC-MSC采用无血清培养体系传代倍增数明显高于含胎牛血清的培养体系的传代倍增数(P<0.05).UC-MSC表达CD29、CD44、CD90、CD73、CDl05、HLA-ABC抗原,不表达CD45及CD34等造血细胞抗原.无血清培养的UC-MSC按MSC:T细胞比例为1:100、1:10及1:5共培养的放射性核索每分钟闪烁计数(CPM)值分别为(4.57 4-0.14)× 104、(2.04±0.16)×104和(0.42±0.04)×104,含胎牛血清制备的UC-MSC共培养对应的CPM值分别为(5.29±0.18)×104、(2.55±0.15)×104和(0.52±0.03)×104,无血清培养的UC-MSC抑制T细胞增殖作用较含血清培养的UC-MSC抑制作用更明显(P<0.05).结论 与含胎牛血清的完全培养基相比无血清培养的人UC-MSC细胞直径小、早期传代增殖潜能增加、无异种蛋白.无血清培养基制备的UC-MSC抑制T细胞增殖活性高于含胎牛血清培养基制备的UC-MSC.