大肠杆菌外膜蛋白ompW基因敲除菌的构建及其对两种抗生素的敏感性

• 作者: 吴贤斌 潘建义 田丽花 赵辅昆 邹海杰
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Red同源重组 外膜蛋白 OmpW 最小抑菌浓度 生存率
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 侵染和免疫
• 页码范围: 1021-1026
• 分类号: Q933
• 语种: 中文

摘要

探讨大肠杆菌ompW基因敲除后,硫酸新霉素和氨苄青霉素对敲除菌最低抑菌浓度(MIC)和生存率的影响,进而分析OmpW的功能.[方法]运用Red重组技术将大肠杆菌K12染色体上基因ompW敲除,构建缺陷株△ompW.然后分别测定硫酸新霉素和氨苄青霉素对正常菌和△ompW菌的最小抑菌浓度(MIC)及次抑菌浓度(1/2 MIC)下K12和△ompW菌的生存率.[结果]经PCR鉴定和通过提取膜蛋白进行western blot 分析表明,成功获得ompW敲除菌.抗生素分析表明,K12菌对硫酸新霉素的MIC为8.0 μg/mL,生存率为98.0％；△ompW菌对新霉素的MIC为1.7 μg/mL,而其生存率仅为39.0％.而k12对氨苄新霉素的MIC为16.0 μg/mL,△ompW为3.3 μg/mL;1/2 MIC下K12生存率为70.4％,而△ompW为30.3％.[结论]ompW基因缺陷株对两抗生素的敏感性大大增强,表明ompW在细菌抗性方面起着关键作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵辅昆	浙江理工大学生命科学学院	49	150	7.0	10.0
2	潘建义	浙江理工大学生命科学学院	13	21	3.0	4.0
3	吴贤斌	浙江理工大学生命科学学院	2	11	2.0	2.0
4	邹海杰	浙江理工大学生命科学学院	2	11	2.0	2.0
5	田丽花	浙江理工大学生命科学学院	3	8	1.0	2.0