毛白杨PtPCP—like基因的克隆及其遗传转化初报

• 作者: 刘军梅 叶梅霞 安新民 李昊 李英 王佳 郭斌 陈仲
• 来源期刊: 北京林业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 毛白杨 烟草 qRT-PCR PtPCP—like
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 林学
• 页码范围: 31-36
• 分类号: S718.46
• 语种: 中文

摘要

利用滤纸吸附噬菌体一PCR法，从毛白杨花芽cDNA文库中分离克隆了PtPCP—like基因cDNA全长序列，测序表明克隆得到的该序列全长595bp，包含一个完整的开放阅读框，编码91个氨基酸；经BLAST分析发现，该基因包含与拟南芥花粉外被蛋白基因相似的序列，命名为PtPCP—like。采用RT—PCR技术检测PtPCP—like基因在各个组织部位的表达模式，结果显示在毛白杨的根和雄花芽中表达丰度最高，而在雌花芽部位表达丰度最低。并且构建35S：：P炉CP—like植物表达载体，采用农杆菌介导法将PtPCP—like基因导人烟草中，获得了一批阳性转化植株。采用qRT—PCR技术检测PtPCP—like基因在各个转基因烟草中的表达模式，结果显示在转基因烟草中各个株系均比野生型表达量高，且不同株系间相对表达量差异显著。