建立一种改良方法分离大鼠肝星状细胞

• 作者: 万苹 宋正己 彭伟 李玉莲 范红 陈艳敏
• 来源期刊: 昆明医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 分离 大鼠 肝星状细胞
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 专家论坛
• 页码范围: 18-20,24
• 分类号: R575.2
• 字数: 2286字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-4706.2012.06.005

摘要

目的 建立一种经济、稳定可靠的HSC分离方法,为体外研究提供细胞模型.方法 Hanks液在体灌洗大鼠肝脏,离体后用Ⅳ胶原酶、链蛋白酶、DNaseI消化肝脏,12% Nycodenz连续梯度液分离大鼠HSC,计数细胞得率,0.2%台盼蓝染色计算细胞活率.自发荧光、Desmin、α-SMA免疫荧光染色对HSC进行鉴定和纯度分析.结果 分离HSC得率(3.7±0.6)×107/只大鼠,细胞活率＞90%,分离第1天自发荧光和第3天desmin 染色阳性细胞＞90%.HSC随着体外培养形态明显改变,分离培养7 d后α-SMA阳性细胞>90%,培养14 d或传代后＞95%.结论 肝脏离体后消化能达到在体消化同样的效果,应用Nycodenz密度分离介质可获得满意的HSC得率和纯度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范红	昆明医科大学附属昆华医院消化内科	3	3	1.0	1.0
2	陈艳敏	昆明医科大学附属昆华医院消化内科	2	3	1.0	1.0
3	宋正己	昆明医科大学附属昆华医院消化内科	2	3	1.0	1.0
4	李玉莲	昆明医科大学附属昆华医院消化内科	1	3	1.0	1.0
5	彭伟	昆明医科大学附属昆华医院消化内科	1	3	1.0	1.0
6	万苹	昆明医科大学附属昆华医院消化内科	1	3	1.0	1.0