microRNA383调节人髓母细胞瘤Daoy细胞系中PRDX3的表达

• 作者: 刘汉勇 张石芬 彭全洲 成志强 王晓玫 胡锦涛 许静 金红涛 高利昆
• 来源期刊: 中华病理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 髓母细胞瘤 微RNAs 过氧化物酶类 细胞系,肿瘤
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 547-552
• 分类号: R739.41
• 字数: 6264字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0529-5807.2012.08.009

摘要

目的 探讨microRNA383( miR-383)对人髓母细胞瘤Daoy细胞系中PRDX3基因的表达及细胞增殖活性与凋亡等的影响.方法 应用即时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测人髓母细胞瘤组织(15例)、Daoy细胞系、对照脑组织(5例)中miR-383及PRDX3mRNA表达水平；采用Western blot法检测人髓母细胞瘤组织、Daoy细胞系、对照脑组织中PRDX3基因蛋白表达水平；人工合成miR-383模拟体(mimics)转染人髓母细胞瘤Daoy细胞系,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法、流式细胞术等实验方法检测转染后各组Daoy细胞增殖与凋亡、细胞内活性氧水平、线粒体膜电位水平的变化.结果 15例人髓母细胞瘤组织中13例(13/15) miR-383表达水平较对照脑组织明显下调,14例( 14/15) PRDX3 mRNA表达水平较对照脑组织显著增高.miR-383、PRDX3mRNA在人髓母细胞瘤Daoy细胞系中表达水平分别为对照脑组织的0.353、1.315倍.PRDX3蛋白表达水平在人髓母细胞瘤组织、Daoy细胞系中较对照脑组织增高.miR-383mimics转染后24、48 h,实验组miR-383平均显著高于空白对照组,且48 h更加显著；而PRDX3mRNA、蛋白表达水平48 h较空白对照组显著降低.CCK-8法检测提示实验组中细胞增殖率较对照组明显降低(P＜0.05).Annexin VFITC法检测转染后48 h细胞凋亡结果显示miR-383 mimics实验组细胞早期凋亡率(11.60±0.30)％明显高于空白对照组(2.30±0.20)％(P=0.000).细胞内活性氧水平检测结果显示转染后24、48 h实验组较空白对照组细胞内活性氧水平明显升高,且48 h更加显著.线粒体膜电位水平检测结果显示转染后24h实验组线粒体膜电位水平较空白对照组明显降低.结论 与对照脑组织相比,miR-383在人髓母细胞瘤组织、Daoy细胞系中表达降低,PRDX3基因表达升高.上调miR-383可降低Daoy细胞系中PRDX3基因表达,并有效抑制Daoy细胞增殖活性,促进Daoy细胞凋亡,出现Daoy细胞内活性氧水平升高,线粒体膜电位水平降低的细胞功能学变化.