TGF-β3修饰退变髓核细胞移植修复兔退变椎间盘的效果观察

• 作者: 宋希元 彭圣智
• 来源期刊: 中国修复重建外科杂志
• 关键词: 髓核细胞 TGF-β3 基因治疗 椎间盘退变 兔
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 脊柱脊髓修复与功能重建
• 页码范围: 790-795
• 页数: 6页
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨TGF-β3基因修饰后退变髓核细胞生物学效应以及植入兔退变椎间盘后对退变椎间盘的影响.方法 将重组腺病毒载体Ad-TGF-β3与第2代退变髓核细胞按10:1比例混合培养转染(Ad-TGF-β3组),待细胞融合后传代,MTT检测转染细胞增殖活性,Western blot检测TGF-β3蛋白含量,免疫细胞化学染色观察对数生长期转染细胞Ⅱ型胶原染色阳性率；采用病毒空载体转染髓核细胞(Adv组)和未经转染髓核细胞(空白组)作为对照.取30只新西兰兔,体重3.2～3.5 kg,雌雄不限,通过针刺L3、4、L4、5和L5、6椎间盘制备椎间盘退变模型.将实验动物按照随机数字法分为3组,转染细胞组(A组,n=12)、退变细胞组(B组,n=12)和空白对照组(C组,n=6).A、B组将100 μL浓度为1×105个/mL对应细胞悬液注射入退变椎间盘,C组同法注入等量PBS.注射后6、10、14周取A、B组各4只、C组2只实验动物处死,取L3、4、L4、5和L5、6椎间盘行组织学观察,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和蛋白多糖mRNA表达.结果 Ad-TGF-β3转染后髓核细胞活性明显改善;转染后3、7、14d,TGF-β3在髓核细胞内表达逐渐升高;Ad-TGF-β3组髓核细胞细胞质内见棕黄色Ⅱ型胶原阳性染色,阳性率显著高于Adv组及空白组(P＜0.05).组织学观察示,A组椎间盘退变程度较B、C组明显减轻.6、10、14周A组Ⅱ型胶原和蛋白多糖mRNA表达显著高于B、C组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 TGF-β3基因修饰退变髓核细胞后可明显改善细胞生物活性,转染后髓核细胞植入兔体内可明显增加退变椎间盘的基质分泌.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋希元		22	46	4.0	5.0
2	彭圣智		14	24	4.0	4.0