猪戊型肝炎病毒Ⅳ型衣壳蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 周恩民 肖一红 胡守彬 赵菲菲 赵钦 陈福勇
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪戊型肝炎病毒 衣壳蛋白 单克隆抗体 鉴定
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 950-955
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 4472字
• 语种: 中文

摘要

为获得猪戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)Ⅳ型衣壳蛋白单克隆抗体,将猪HEV衣壳蛋白的C端267(408-675)个氨基酸基因序列克隆人原核表达载体pET-28a(+),构建重组质粒pET-28a-ORF2-C,转化E.coli Rosetta (BL21)感受态细胞进行诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定,纯化后免疫小鼠.取免疫小鼠的脾脏与鼠骨髓瘤细胞SP2/O融合制备单克隆抗体.通过间接ELISA和竞争ELISA方法筛选并鉴定单抗.结果表明蛋白得到正确、高效表达,获得3株识别不同的抗原表位区的单克隆抗体,分别命名为Mab-1E4 (IgG1)、Mab-2C7 (IgG1)和Mab-2G9 (IgG2b),其中1E4和2G9能阻断临床阳性猪血清,提示该2株单克隆抗体识别的抗原表位是猪HEV Ⅳ型衣壳蛋白上重要的抗原表位区,而单抗Mab-2C7不能阻断.本研究为猪HEV Ⅳ型的诊断及研究提供重要工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖一红	山东农业大学动物科技学院免疫生物学实验室	50	255	6.0	15.0
2	陈福勇	中国农业大学动物医学院	34	288	10.0	15.0
3	胡守彬	山东农业大学动物科技学院免疫生物学实验室	2	0	0.0	0.0
4	赵菲菲	山东农业大学动物科技学院免疫生物学实验室	2	0	0.0	0.0