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摘要:
目的 构建弓形虫微线体蛋白( MIC3)的真核表达质粒,为进一步研究MIC3蛋白的功能奠定基础.方法 PCR法扩增弓形虫MIC3目的基因,将纯化的目的基因插入到真核表达质粒PCDNA3.0,并转入DH5α 宿主菌中,在含有青霉素的SOB平板上筛选阳性重组子,采用酶切和PCR扩增法对重组质粒进行鉴定;应用HifectinⅡ真核细胞转染试剂将弓形虫PCDNA-MIC3真核表达质粒转染幼地鼠肾细胞(BHK),表达产物用SDS-PAGE进一步确认,ELISA法检测表达蛋白的免疫原性.结果 重组质粒PCDNA-MIC3经单双酶切及PCR扩增都得到以原插入片段MIC3基因1120 bp大小相同的片段,PCDNA-MIC3能在BHK细胞中高效表达,表达产物能被弓形虫特异性血清所识别.结论 成功构建了弓形虫MIC3基因真核表达质粒PCDNA-MIC3.
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篇名 弓形虫MIC3基因真核表达质粒的构建及其在BHK细胞中的表达
来源期刊 山东医药 学科 医学
关键词 弓形虫微线体蛋白 真核表达质粒 PCDNA-MIC3表达
年,卷(期) 2012,(31) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 11-13
页数 分类号 R382.5
字数 2667字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1002-266X.2012.31.004
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 刘涛 69 370 11.0 16.0
2 黄雨婷 19 58 5.0 6.0
3 卢丽丹 34 122 7.0 8.0
4 唐莉娜 20 46 5.0 5.0
5 徐丽娜 2 4 1.0 2.0
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弓形虫微线体蛋白
真核表达质粒
PCDNA-MIC3表达
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期刊影响力
山东医药
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1002-266X
37-1156/R
大16开
济南市燕东新路6号
24-8
1957
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